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檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應用
檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應用
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檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應用

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檸檬酸的物理性質:

在室溫下,檸檬酸為無色半透明晶體或白色顆粒或白色結晶性粉末,無臭、味極酸,有澀味,有微弱腐蝕性,潮解性強,并伴有結晶水化合物生成,在潮濕的空氣中微有潮解性。它可以以無水合物或者一水合物的形式存在:檸檬酸從熱水中結晶時,生成無水合物;在冷水中結晶則生成一水合物。加熱到78 ℃時一水合物會分解得到無水合物。在15攝氏度時,檸檬酸也可在無水乙醇中溶解。檸檬酸結晶形態因結晶條件不同而不同,有無水檸檬酸C6H8O7也有含結晶水的檸檬酸2C6H8O7.H2O、C6H8O7.H2O或C6H8O7.2H?O。


檸檬酸檢測的化學性質:從結構上講檸檬酸是一種三羧酸類化合物,并因此而與其他羧酸有相似的物理和化學性質。加熱至175 ℃時它會分解產生二氧化碳和水,剩余一些白色晶體。檸檬酸是一種較強的有機酸,有3個H+可以電離; 加熱可以分解成多種產物,與酸、堿、甘油等發生反應。

檸檬酸的檢測原理:檸檬酸在酸性緩沖液中,利用反相鍵合色譜法將其從樣品基質中分離出來,根據該類物質在紫外波長下的吸收進行定性和定量分析。


檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應用圖2

實驗的試劑:

1)溶劑:水,過濾后的二次蒸餾水

2)流動相:0.5%的H3PO4/KH2PO4緩沖液,PH=2.81, 含2.5%乙腈

3)檸檬酸標準品;純度99.2%和99.5% 

4)檸檬酸標準溶液分別準確稱取蘋果酸、檸檬酸標準品0.2g 和0.02g ,精確至0.0001g,用過濾后的二次蒸餾水將標準品溶解,轉移、定容于50ml容量瓶中,混勻后貼標簽備用。

5)檸檬酸標準工作溶液分別將上述標準品貯備液以5倍和10倍比例稀釋,得到三個不同濃度的系列,在給定的色譜條件下,每一濃度樣品進樣三次,然后繪制出標準工作曲線。標準溶液應避光,在0~4℃下貯存,標準液貯存期不超過二個月。

儀器所使用的玻璃儀器必須是潔凈的。實驗過程中需要使用的儀器:液相色譜,單元泵,可變波長檢測器,化學工作站 ,色譜柱,進樣器,需要的色譜條件:流動相:0緩沖液(PH=2.81);含乙腈。流量: 柱溫:40℃檢測進樣量:


檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應用圖3

關于檸檬酸的實驗測定步驟:

1。樣品溶液的制備稱取濃縮果汁4.0~5.0g 或清汁10ml,精確至0.01g,用二次蒸餾水將其溶于50ML 容量瓶中,定容至刻度,混勻后,用0.45um濾膜的過濾器將其過濾至樣品瓶中,貼上標簽備用。

2。測定:在以上色譜條件下,運行儀器和測試方法,待基線穩定后,按照標準溶液、樣品的順序進樣。

3。計算根據標準液繪制的標準曲線進行外標法定量,保留時間和響應因子均由標準液確定。

關于檸檬酸保存方法和儲存條件:

檸檬酸產品用內襯食品用聚乙烯袋及雙層牛皮紙

應注意防雨、防潮、防曬、不得與有毒、異味、有色粉未或腐蝕性物質混裝、混運。

本品應貯存于陰涼、干燥庫房中不宜露天堆放。



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